olympus熒光顯微鏡利用一個高發(fā)光效率的點光源,經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光作為激發(fā)光,激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察,在強烈的對襯背景下即使微弱的熒光也能觀察到,敏感性高,用于神經(jīng)梅毒、胎傳梅毒-IgM抗體檢測、自身免疫病ENA\ANA、雙鏈-DNA抗體核分型。
olympus熒光顯微鏡使用方法:
首先是隨即選擇的熒光標(biāo)本出現(xiàn)在Specimen Image窗口,同時紫外-藍(lán)光-綠光的三帶通激發(fā)光濾光片組合(DAPI-FITC-TRITC)的光譜特征顯示在“濾光片組合”(Filter Set Spectral Profiles)欄下。通過選擇在“光譜交叉部分”(Spectral Cross Sections)下合適的check box(Absorption或Emission),熒光的吸收和發(fā)射光譜交叉的部分(濾光片投射帶通的重疊部分)就可以單一或者一起觀察了。當(dāng)一個或者多個check box被激活時,組合的濾光片傳送和發(fā)射光譜會附加在用于標(biāo)本熒光觀察的吸收和發(fā)射光譜(不包括自發(fā)熒光的植物標(biāo)本)上。熒光吸收光譜在輔助區(qū)時用褐色填充的,而在相應(yīng)的發(fā)射光光譜區(qū)用灰色填充的。濾光片組合的波長特征以較低的位置展示在黑色的長方形box內(nèi)。這些數(shù)值常常根據(jù)滑塊從左到右轉(zhuǎn)換而更新。
為了操作這個輔助部分,使用Filter Set滑塊可以將三帶寬激發(fā)的兩個濾光片組合相互轉(zhuǎn)換。因為滑塊是由左至右滑動的,所以激發(fā)光和阻擋濾光片以及多色反光鏡的光譜會同時轉(zhuǎn)換。值得注意的是,持續(xù)轉(zhuǎn)換光譜并不意味著任何的濾光片組合都是可能的,也不意味單一的濾光片組合的光譜可以隨意改變。在選擇的濾光片組合中改變光譜范圍很簡單,有助于在每一個光學(xué)模塊中的濾光片組合建立。
單一的濾光光譜(激發(fā)光,發(fā)射光和多色反光鏡)可以通過選擇和去除Filter Set Spectral Profiles下相應(yīng)的check box來添加和刪除。除此之外,熒光的吸收和發(fā)射光譜可以通過同樣的操作添加和刪除(Spectral Cross Sections)。觀察樣本的圖像會隨著濾光片的轉(zhuǎn)換而改變,反應(yīng)出信號強度和對比度的變化;而這種變化是由滑塊移動引起濾光片組合產(chǎn)生的。一個新的目標(biāo)樣本可以通過Choose A Specimen的下拉菜單隨時進行,而用于觀察的熒光種類就列在下拉菜單中。在任何情況下,樣本都經(jīng)過兩種或者多種熒光探針的染色,通過選擇的寬窄的帶通阻擋濾光片組合來觀察。